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空间蛋白组

简要描述:空间蛋白组(Spatial Proteomics)是在组织原位、保留空间位置信息的前提下,对蛋白质表达、定位与互作进行高通量、定量分析的技术集群,核心是把 “蛋白功能" 和 “空间位置" 绑定,解决传统蛋白组丢失微环境信息、单细胞蛋白组丢失组织架构的问题。

  • 更新时间:2026-05-22 12:02:30
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详细介绍

一、核心价值

· 传统 Bulk 蛋白组:组织匀浆后测整体,无空间信息,掩盖区域异质性(如肿瘤边缘 vs 中心)。

· 单细胞蛋白组:拿到单细胞数据,但解离破坏原位结构,丢失细胞间空间关系与微环境信号。

· 空间蛋白组:在完整组织切片上,同时获得:蛋白身份 + 表达量 + 空间坐标 + 细胞定位,直接解析原位微环境与细胞互作。


二、主流技术(分两大阵营)

1)抗体 - 成像型(原位、高分辨率、中通量)

CODEX/PhenoCycler:寡核苷酸标记抗体多轮染色 - 成像 - 漂白单张切片测40–100 种蛋白,亚细胞分辨率,适合免疫微环境、肿瘤异质性。

IMC(成像质谱流式):金属标签抗体激光消融质谱检测,~40 种蛋白,单细胞分辨率,适合 FFPE 组织、免疫细胞亚群。

DSPNanoString:光切割标签 + 数字计数,100–1200 种蛋白 / RNA,可圈选任意 ROI(如肿瘤巢、基质),适合临床样本、生物标志物筛选。

2)质谱 - 区域型(无偏、高通量、低分辨率)

LCM+LC-MS/MS:激光捕获显微切割(LCM)切取目标区域(5–10 μm蛋白提取质谱鉴定,数千种蛋白,无偏筛选,适合 FFPE / 冷冻组织、差异蛋白发现。

MALDI-IMS(质谱成像):组织切片直接质谱扫描,100–1000 种蛋白 / 肽段,空间分辨率 50–200 μm,无需抗体,适合整体组织分布、肿瘤边界标志物。

 

三、实验流程(以 LCM+MS 为例)

1. 样本制备FFPE / 冷冻组织→5–10 μm 切片→HE / 免疫荧光染色定位目标区域(ROI)。

2. 激光捕获(LCM:显微镜下精准切割 ROI(如肿瘤、免疫灶)收集到微量管。

3. 蛋白提取与酶解:裂解yi酶消化肽段混合物。

4. LC-MS/MS:液相分离质谱检测蛋白鉴定与定量。

5. 空间映射:将蛋白表达量回贴到原始组织图像,生成空间蛋白图谱。


四、应用场景

· 肿瘤微环境:解析肿瘤中心 / 边缘 / 基质的蛋白差异,发现耐药亚群、免疫逃逸机制、新治疗靶点。

· 神经科学:阿尔茨海默病斑块、帕金森病路易小体的原位蛋白网络,揭示神经炎症与退行机制。

· 发育生物学:胚胎 / 器官发育的空间蛋白图谱,追踪分化轨迹与关键调控蛋白。

· 临床转化FFPE 样本中筛选预后 / 疗效标志物,指导精准分型与免疫zhi疗。

· 空间多组学整合空间蛋白组 + 空间转录组 + 单细胞,多维解析基因 - 蛋白 - 功能的空间调控网络。

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